معتبرسازی روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC ) جهت شناسایی و تعیین مقدار لیزینوآلانین در شیر خشک نوزادان
|
گلناز کرمی ، مریم شکرچی ، رویا خسروخاور* |
مرکز تحقیقات آزمایشگاهی غذا و دارو ، khosrokhavar_r@yahoo.com |
|
چکیده: (6326 مشاهده) |
سابقه و هدف: لیزینوآلانین طی تهیه و فرآوری شیر خشک در اثر حرارت، pH قلیایی با واکنش حذفی بتا، تشکیل دهیدروآلانین و واکنش با ترکیبات آمین دار ایجاد میگردد. در این مطالعه طراحی و معتبر سازی روشی مناسب جهت شناسایی و تعیین مقدار لیزینوآلانین در شیر خشک نوزادان با استفاده از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) مد نظر قرار گرفت.
مواد و روشها: در این پژوهش ابتدا شرایط بهینه HPLC (ستون C18، آشکارساز فلورسانس، مشتق سازی توسط دنسیل کلراید، سرعت جریان فاز متحرک ml/min 9/0، شویش گرادیانت و فاز متحرک شامل بافر فسفات 7=pH و استونیتریل) تعیین شد. بر اساس شرایط فوق روش معتبر سازی گردید و کارآمدی روش معتبر شده با آنالیز 10 نمونه شیر خشک بررسی شد.
یافتهها: نمودار کالیبراسیون در محدوده غلظتی 80- 5 میلیگرم بر لیتر، خطی بود. ضریب همبستگی 9949/0= R2 به دست آمد. حد تشخیص (Limit of Detection) mg/L2 و حد تعیین مقدار (Limit of Quantification)mg/L 5 و درصد بازیافت (Recovery) 8/87 _ 7/83 درصد به دست آمد. در ارزیابی دقت روش، انحراف استاندارد نسبی (RSD%) سطح منحنی و غلظت به دست آمده محاسبه شد. برای Intra day به ترتیب کمتر از 87/3 و 7/2 درصد و برای Inter day به ترتیب کمتر از 2/5 و 4/7 درصد به دست آمد. در 7 مورد از شیرهای آنالیز شده، لیزینوآلانین شناسایی نشد و در 3 نمونه مقدار آن بینLOD, LOQ به دست آمد.
نتیجه گیری: این روش در جهت تشخیص و شناسایی لیزینوآلانین در شیرخشک نوزادان از دقت، صحت و کارایی لازم برخوردار بوده و در دسترس و مقرون به صرفه میباشد.
واژگان کلیدی: لیزینوآلانین، شیر خشک نوزادان، کروماتوگرافی مایع باکارایی بالا، آشکارساز فلورسانس، معتبرسازی |
|
واژههای کلیدی: لیزینوآلانین، شیر خشک نوزادان، کروماتوگرافی مایع باکارایی بالا، آشکارساز فلورسانس، معتبرسازی. |
|
متن کامل [PDF 281 kb]
(14809 دریافت)
|
نوع مقاله: پژوهشي |
موضوع مقاله:
صنايع غذايي دریافت: 1394/10/30 | پذیرش: 1395/4/2 | انتشار: 1395/4/21
|
|
|
|