fa اندازه‌گیری همزمان لیکوپن و بتا-کاروتن سرم به روش صنايع غذايي Food Science پژوهشي Research سابقه و هدف: لیکوپن و بتا-کاروتن، کاروتنوئیدهایی با خاصیت آنتی اکسیدانی قوی هستند که اساساً از طریق سبزی و میوه‌ وارد بدن می‌شوند. اندازه‌گیری سطوح سرمی کاروتنوئیدها برای ارزیابی وضعیت آنتی اکسیدانی بدن و نیز برای تعیین روایی پرسشنامه‌های بررسی مصرف سبزیها و میوه‌ها کاربرد دارد. مواد و روشها: این مطالعه با هدف راه اندازی یک روش آزمایشگاهی معتبر، نسبتاً سریع و کم هزینه برمبنای کروماتوگرافی با کارایی بالا برای اندازه گیری سطوح سرمی لیکوپن و بتا-کاروتن انجام شد. در این مطالعه، پس از آزمودن شرایط گوناگون کروماتوگرافی، نخست پروتئین‌های سرم به کمک اتانول رسوب داده شدند و سپس لیکوپن و بتا-کاروتن با هگزان استخراج شدند. فاز آلی در دمای C 40 تحت گاز ازت، تبخیر شد و مادۀ باقیمانده در آمیزه‌ای از فاز متحرک (متانول: استونیتریل: تتراهیدروفوران، نسبت 50:45:5، حجمی، حاوی 01/0درصد هیدروکسی تولوئن بوتیله) و دی‌اتیل‌اتر (نسبت 2 به 1 حجمی) حل و µL20 از آن به ستون Novopack C18 تزریق شد. یافته ها‌: زمان بازداری لیکوپن و بتا-کاروتن در میزان جریان mL/min 5/1 و طول موج nm 472 به ترتیب 1/5 و 6/8 دقیقه و کل زمان کروماتوگرافی 11 دقیقه به دست آمد. میانگین و انحراف معیار درصد بازیافت لیکوپن و بتا-کاروتن در آزمایشهای متعدد به ترتیب معادل 8/7±5/95% و 7±2/95% به دست آمد. تغییرات درون و میان سنجشی برای لیکوپن به ترتیب معادل 6/1 و 75/5 درصد و برای بتا-کاروتن به ترتیب 3 و 5/3 درصد بود. نتیجه گیری: آزمونهای کنترل کیفی حاکی از حساسیت و دقت بالای این روش بودند. علاوه براینکه زمان و هزینۀ نسبتاً اندک آزمایش، آن را برای مقاصد پژوهشی و به ویژه مطالعات جمعیتی مناسب می‌کند، در عین حال، این روش نیز مانند هر روش آزمایشگاهی دیگری محدودیتهایی هم دارد. به طور مثال، معلوم نیست با این روش تا چند آنالیت را می‌توان همزمان اندازه‌گیری نمود. روشن کردن این مساله نیازمند مطالعات بیشتری است. Background and Objectives: Lycopene and -carotene, two strong antioxidant carotenoids, enter our bodies mostly through vegetables and fruits. Determination of the serum carotenoid levels may be used both to assess body antioxidant status and to validate vegetable and fruit consumption questionnaires. The aim of this study was to design and setup a rather simple, reliable and less expensive high-performance liquid chromatography (HPLC)-based method for simultaneous determination of serum lycopene and -carotene levels. Materials and Methods: After examining various chromatographic conditions, the following method was found to be most reliable. َAfter protein precipitation with ethanol, the carotenoids were extracted using n-hexane, which was then evaporated under nitrogen flow at 40°C. The sediment was reconstituted with a mixture of mobile phase (methanol:acetonitrile:tetrahydrofurane, 50:45:5, v/v/v) and diethyl ether (2:1, v/v), 20µL of which was injected to the column Novopack C18. Results: With a flow rate of 1.5mL/min at 472nm, retention times of lycopene and -carotene were 5.1 and 8.6 minutes, respectively, and the run time was 11 minutes. The percent recoveries (mean±SD) of lycopene and beta-carotene were 95.5%±7.8 and 95.2±7.0, respectively, and their intra- and inter- measurement variations 1.6% and 5.75% and 3.0% and 3.5%, respectively Conclusions: Quality control tests indicated high sensitivity and precision of the method. The method is quite suitable for use in research and, particularly, in population studies, although it has, like any other method, its own limitations. Furher studies are needed in this area. HPLC، لیکوپن، بتا-کاروتن HPLC, Lycopene, -carotene 45 50 http://nsft.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-21&slc_lang=fa&sid=1 T Neyestani تیرنگ نیستانی tneyestani@nnftri.ac.ir 11500319475328460096 11500319475328460096 Yes A Gharavi اعظم غروی 11500319475328460097 11500319475328460097 No