fa جداسازی و شناسایی پپتیدهایی با خواص آنتی‌اکسیدانی از پروتئین جوانه گندم با استفاده از آنزیم پپسین صنايع غذايي Food Science پژوهشي Research <span style="font-family:b titr;">سابقه و هدف:</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">در سال&shy;های اخیر، علاقه زیادی به شناسایی و تشخیص پپتیدهای زیست فعال حاصل از منابع گیاهی نشان داده شده است. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">هیدولیز آنزیمی پروتئین‌ها، رایج&shy;ترین روش برای تولید پپتیدهای زیست فعال است. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">جوانه</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">گندم</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">یکی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">از</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">مهم</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">ترین</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">فراوردههای</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">جانبی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">حاصل</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">از</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">آسیاب</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">گندم</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">غنی از نظر پروتئین با ترکیب اسید آمینه مناسب می&shy;باشد که در این تحقیق از آن به عنوان یک منبع پروتئینی مناسب برای هیدرولیز آنزیمی جهت تولید پپتید آنتی&shy;اکسیدانت مورد استفاده قرار گرفت.</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span><br> <span style="font-family:b titr;">مواد و روش</span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">‌</span></span><span style="font-family:b titr;">ها:</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">هیدرولیز آنزیمی پروتئین جوانه گندم با استفاده از آنزیم پپسین انجام شد. عوامل مؤثر در هیدرولیز، جهت دستیابی به بالاترین فعالیت آنتی&shy;اکسیدانی پپتیدها توسط روش سطح پاسخ (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">RSM</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">) بهینه سازی شدند. سپس فراکسیون&shy;ها در نقطه بهینه با استفاده از</span></span><br> <span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">RP-HPLC</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;"> جدا شدند و فراکسیون با بالاترین فعالیت مهار رادیکال </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">ABTS</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;"> با استفاده از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">LC/MS/MS</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;"> شناسایی شد.</span></span><br> <span style="font-family:b titr;">یافته</span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">‌</span></span><span style="font-family:b titr;">ها</span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">‌</span></span><span style="font-family:b titr;">:</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">مدل ریاضی مشخص کننده ناحیه&shy;ای با بیشترین فعالیت آنتی&shy;اکسیدانی منطبق با دمای 37 درجه سانتی&shy;گراد، زمان 270 دقیقه و نسبت آنزیم به سوبسترا 58/1<strong> (</strong></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">w/w</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">%) بود. نتایج تعیین توالی نشان داد که پپتید خالص شده دارای توالی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">KELPPSDADW</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;"> و وزن مولکولی 54/1157 دالتون است. این پپتید به عنوان جذب کننده رادیکال (% 1/1</span></span><span style="font-size:11.0pt;">&plusmn;</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">86 : </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">ABTS</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">، % 4/1</span></span><span style="font-size:11.0pt;">&plusmn;</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">51 : </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">DPPH</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">) عمل کرده است.</span></span><br> <span style="font-family:b titr;">نتیجه گیری:</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">این نتایج نشان داد که پپتید </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">KELPPSDADW</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;"> از پروتئین جوانه گندم، دارای فعالیت آنتی&shy;اکسیدانی </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">قوی </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">است.</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span> <strong>Background and Objectives: </strong>In recent years, there has been a growing interest to identify bioactive peptides from plant sources. Enzymatic hydrolysis of proteins is the most common method to produce bioactive peptides. Wheat germ is one of the most important by-products from flour processing industry that it is rich in protein and amino acids composition. In this study, it was used as a valuable protein source to produce antioxidant peptide.<br> <strong>Materials & Methods: </strong>Enzymatic hydrolysis of wheat germ was done by pepsin. The hydrolysis parameters were optimized in production of wheat germ protein hydrolysates with the highest antioxidant activity using response surface methodology. Then the hydrolysates obtained under optimized conditions were fractionated by RP-HPLC and fraction that exhibited the highest ABTS radical scavenging was identified by nano-LC/MS/MS proteomics.<br> <strong>Results: </strong>The mathematical model presented a plateau region with maximum antioxidant activity at the following critical values: temperature = 37⁰C, time = 270 min and E/S ratio=1.58%. The results of sequencing showed that the purified peptide had the sequence of KELPPSDADW with the molecular weight of 1157.54 Da. This peptide had scavenging activity against DPPH (51&plusmn;1.4%) and ABTS (86&plusmn;1.1%)<br> <strong>Conclusion: </strong>The<strong> r</strong>esults indicated that the peptide KELPPSDADW isolated from wheat germ protein has a strong antioxidant activity<br> &nbsp; جوانه گندم, پپتید آنتی اکسیدانت, LC/MS/MS Wheat germ, Antioxidant peptide, LC/MS/MS 39 50 http://nsft.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-291-16&slc_lang=fa&sid=1 Z Karami زهره کرمی 11500319475328460017557 11500319475328460017557 No University of Tabriz دانشگاه تبریز H Peighambardoust سید هادی پیغمبردوست 11500319475328460017558 11500319475328460017558 Yes University of Tabriz دانشگاه تبریز J Hesari جواد حصاری 11500319475328460017559 11500319475328460017559 No University of Tabriz دانشگاه تبریز B Akbari-Adergani بهروز اکبری ادرگانی 11500319475328460017560 11500319475328460017560 No Food and Drug Organization سازمان غذا و دارو